如何制造高纯度小鼠成纤维细胞系?

如何制造高纯度小鼠成纤维细胞系?
原代分离采用组织酶消化法,从小鼠皮下组织提取。37°C孵育1小时,离心收集。 纯化步骤包括差速贴壁,24小时后去除非贴壁细胞。重复两次提升纯度至98%。...

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原代分离采用组织酶消化法,从小鼠皮下组织提取。37°C孵育1小时,离心收集。

纯化步骤包括差速贴壁,24小时后去除非贴壁细胞。重复两次提升纯度至98%。

扩增培养使用无血清介质,添加纤维连接蛋白涂层。密度控制在70%时传代。

质量验证涉及免疫荧光染色FSP1标志物。化工应用需额外毒性筛选。

🧭 核心要点

  • 原代分离采用组织酶消化法,从小鼠皮下组织提取
  • 纯化步骤包括差速贴壁,24小时后去除非贴壁细胞
  • 扩增培养使用无血清介质,添加纤维连接蛋白涂层
  • 质量验证涉及免疫荧光染色FSP1标志物